- Oggetto:
- Oggetto:
Genetica Molecolare e Biologia Cellulare
- Oggetto:
Anno accademico 2014/2015
- Codice dell'attività didattica
- INT0643
- Docenti
- Prof. Fiorella ALTRUDA (Docente Responsabile del Corso Integrato)
Prof. Emanuela TOLOSANO (Docente Titolare dell'insegnamento)
Prof. Saverio Francesco Retta (Docente Titolare dell'insegnamento) - Insegnamento integrato
- C.I. BIOLOGIA E GENETICA (INT0643)
- Periodo didattico
- Primo semestre
- Crediti/Valenza
- 6
- SSD dell'attività didattica
- BIO/13 - biologia applicata
- Modalità di erogazione
- Tradizionale
- Lingua di insegnamento
- Italiano
- Modalità di frequenza
- Obbligatoria
- Tipologia d'esame
- Scritto
- Prerequisiti
- Biologia Cellulare, Genetica Generale, Biologia Molecolare I
- Oggetto:
Sommario insegnamento
- Oggetto:
Obiettivi formativi
Conoscere le principali metodologie di biologia e biotecnologie cellulari
utilizzate nell’ambito della ricerca biomedica di base ed applicata.
• Conoscere in modo approfondito processi cellulari di fondamentale
importanza nell’ambito della ricerca biomedica.
• Suscitare l’interesse per un’approfondita conoscenza dei processi
biologici e per il metodo scientifico d'indagine.
- Oggetto:
Modalità di verifica dell'apprendimento
Verifica scritta con domande aperte riguardanti temi rilevanti degli argomenti del programma a cui lo studente deve rispondere dando prova di conoscere a fondo la materia e di essere in grado di comprendere il ruolo dei processi studiati.
- Oggetto:
Programma
BIOLOGIA:
1) Le colture cellulari: le colture primarie, le linee stabilizzate, le cellule
immortalizzate, gli ibridomi, le cellule staminali.
2) L’analisi delle proteine cellulari in vitro (saggi qualitativi e quantitativi):
estrazione e purificazione delle proteine; analisi delle proteine mediante
elettroforesi unidimensionale e bidimensionale, immunoprecipitazione,
Western blotting, marcatura metabolica e saggi radioimmunologici,
analisi dello stato di attivazione di proteine con funzioni regolatrici, saggi
di attività chinasica. Le applicazioni di spettrometria di massa. Studi di
interazione proteina-proteina: i saggi di “pull-down”; la tecnica del doppio
i b r i d o .
3) Le proteine ricombinanti: i sistemi di espressione procariotici ed
eucariotici, la produzione e purificazione proteine di fusione, gli impieghi
delle proteine di fusione.
4) La trasfezione delle cellule eucariotiche per l’espressione di proteine di
interesse: tecnica del Ca2+/fosfato, tecnica del DEAE-dextrano, i
liposomi, l’elettroporazione, i vettori virali.
5) I controlli post-trascrizionali dei livelli di espressione delle proteine.
6) L’analisi delle proteine cellulari in vivo (localizzazione, dinamiche
subcellulari e funzioni): microscopia ottica convenzionale e confocale;
tecniche di immunofluorescenza ed immunocitochimica; l’uso delle
proteine di fusione per l’analisi delle funzioni delle proteine; tecniche di
microscopia a multifluorescenza in “time-lapse” per l’analisi delle
dinamiche molecolari.
Le tecniche “F” e le loro applicazioni: “Fluorescence Resonance Energy
Transfer” (FRET), “Fluorescence Recovery After Photobleaching” (FRAP),
“Fluorescence Loss In Photobleaching” (FLIP).
7) Analisi di processi cellulari:
a) I meccanismi di regolazione post-trascrizionale dell’espressione e delle
funzioni dei recettori adesivi.
b) Il traffico vescicolare e le proteine della famiglia Rab: potenziali
bersagli per interventi terapeutici.
c) Le small GTPasi della famiglia Rho: ruoli fisiologici e patologici.
d) I meccanismi di regolazione della traslocazione nucleo-citoplasma di
proteine e la loro alterazione patologica.
e) Modelli cellulari di patologie umane: le Malformazioni Cavernose
C e r e b r a l i .
G E N E T I C A :
Verranno analizzati modelli murini di diverse patologie umane:
1) Modelli murini di emocromatosi
2) Modelli murini di anemia
3) Modelli murini di alterato metabolismo del ferro e dell’eme
4) Modelli murini di diabete
5) Modelli murini di patologie cardiache
6) Modelli murini di patologie infiammatorie
Testi consigliati e bibliografia
- Oggetto:
1) Alberts et al.- “Biologia Molecolare della Cellula” – Zanichelli.
2) Glick e Pasternak – “Biotecnologia Molecolare” – Zanichelli.
3) Reed et al.- “Metodologie di base per le Scienze Biomolecolari” -
Zanichelli.
4) Ninfa e Ballou - “Metodologie di base per la Biochimica e la
Biotecnologia” - Zanichelli.
5) H. Lodish e altri, “Biologia Molecolare della cellula”, Zanichelli
6) Brown, T.A., “Genomes”, New York and London: Garland Science
7) Bibliografia fornita dal docente.
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Orario lezioni
Giorni Ore Aula - Oggetto: