Corso di Laurea Magistrale in Biotecnologie Mediche - Classe LM-9

Biologia Cellulare, Genetica Generale, Biologia Molecolare I

• Conoscere le principali metodologie di biologia e biotecnologie utilizzate nell’ambito della ricerca biomedica di base ed applicata.
• Conoscere in modo approfondito processi cellulari di fondamentale importanza nell’ambito della ricerca biomedica.
• Suscitare l’interesse per un’approfondita conoscenza dei processi biologici e per il metodo scientifico d'indagine.
• Illustrare l'utilizzo di modelli animali per studiare la patogenesi di malattie umane e validare nuovi approcci terapeutici.

 

Al termine dell'insegnamento, gli Studenti dovranno dimostrare di aver acquisito un'approfondita conoscenza delle basi teoriche per lo sviluppo e lo studio di modelli di patologia umana. Inoltre dovranno dimostrare di saper scegliere in modo appropriato gli approcci necessari alla soluzione di specifici quesiti biologici e di saperle integrare correttamente allo scopo.

 

Mista: Didattica frontale ed online

 

Verifica scritta con domande aperte riguardanti temi rilevanti degli argomenti del programma a cui lo studente deve rispondere dando prova di conoscere a fondo la materia e di essere in grado di comprendere il ruolo dei processi studiati.

Prova orale (ove prevista).

 

MODELLI SPERIMENTALI IN AMBITO BIOTECNOLOGICO:

BIOLOGIA (Prof. Retta)

1) Le colture cellulari: colture primarie e linee cellulari stabilizzate.

2) L’analisi delle proteine cellulari in vitro (saggi qualitativi e quantitativi): estrazione e purificazione delle proteine; analisi delle proteine mediante elettroforesi unidimensionale e bidimensionale, immunoprecipitazione, Western blotting. Analisi dello stato di attivazione di proteine con funzioni regolatrici. Studi di interazione proteina-proteina: i saggi di “pull-down”; la tecnica del doppio ibrido.

3) Le proteine ricombinanti: i sistemi di espressione procariotici ed eucariotici, la produzione e purificazione proteine di fusione, gli impieghi delle proteine di fusione.

4) La trasfezione delle cellule eucariotiche per l’espressione di proteine di interesse: tecnica del Ca2+/fosfato, tecnica del DEAE-dextrano, i liposomi, l’elettroporazione, i vettori virali.

5) I controlli post-trascrizionali dei livelli di espressione delle proteine.

6) L’analisi delle proteine cellulari in vivo (localizzazione, dinamiche subcellulari e funzioni): microscopia ottica convenzionale e confocale; tecniche di immunofluorescenza ed immunocitochimica; l’uso delle proteine di fusione per l’analisi delle funzioni delle proteine; tecniche di microscopia a multifluorescenza in “time-lapse” per l’analisi delle dinamiche molecolari.

7) Le tecniche “F” e le loro applicazioni: “Fluorescence Resonance Energy Transfer” (FRET), “Fluorescence Recovery After Photobleaching” (FRAP), “Fluorescence Loss In Photobleaching” (FLIP).

8) Analisi di processi cellulari e molecolari:

• a) I meccanismi di regolazione post-trascrizionale dell’espressione e delle funzioni dei recettori adesivi.
• b) Le small GTPasi della famiglia Rho: ruoli fisiologici e patologici.
• c) Redox signaling e autofagia: ruoli fisiologici e patologici.

9) Modelli cellulari e murini di patologie umane.

 

GENETICA (Prof. Ghigo-Hirsch-Tolosano)

Generazione ed analisi di modelli animali di patologie umane. Le patologie prese in considerazione sono le seguenti:

1. Emocromatosi/patologie da alterato metabolismo del ferro e dell’eme
2. Anemie
3. Neuropatie sensoriali
4. Diabete
5. Fibrosi cistica
   
   
   

 

Le modalità di svolgimento dell'attività didattica potranno subire variazioni in base alle limitazioni imposte dalla crisi sanitaria in corso.

N.B.: In base alle attuali regole di distanziamento legate all'emergenza sanitaria, e a causa della limitata disponibilità e capienza di aule, ciascuno studente avrà la possibilità di iscriversi solo a una delle due prove parziali di "Modelli sperimentali in ambito biotecnologico" (modulo Retta) previste per le sessioni d'esami di Gennaio/Febbraio e Giugno/Luglio.